Countstar细胞计数仪操作手册

Countstar细胞计数仪操作手册

计数仪的标准操作程序 和 细胞计数和活率检测标准操作程序

一、 启动Cedex XS 系统

1. 打开计数仪：按下计数仪上的ON/OFF按钮，按钮亮起蓝色光表示仪器已打开；

2. 打开Cedex XS 控制软件：

① 打开配套电脑，进入Windows操作系统；

② 双击桌面上的Cedex XS 图标，进入Cedex XS 控制中心；

3. 调节白平衡：安装Cedex XS系统或移动系统后必须调节白平衡。 ① 把样品板支架拉出；

② 点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框；

③ 点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存；

④ 调节完毕后关闭对话框。

二、 细胞计数与活性测定

1. 样品制备

① 用培养基或PBS将样品稀释至细胞数不高于5×106/ml；

② 使用0.2%台盼蓝染色（一般为10μl、1：1）：台盼蓝对血清蛋白亲和力更强，若大量血清蛋白导致图像背景过暗，可以将样品离心，用无蛋白培养基或生理盐水悬浮细胞进行计数； ③ 将细胞悬液充分混匀；

④ 用移液枪取细胞悬液加入样品板，每槽10μl；可以一次测定八槽，也可测定单槽。

2. 进样：样品板有八个槽，一次可测定四个样品槽。

① 拉出样品板支架；

② 加有样品方向朝里，将样品板放上支架；

③ 将支架推入计数仪，有少许卡扣感表示已就位：样品槽位置指示灯表示样品测定进程。

三、 软件设置：

1. 打开测定界面：在Cedex XS 控制中心点击MEASURE键，进入测定界面；

2. 设置样品参数：

① 在样品参数栏输入样品名（Reactor ID），可在下拉栏选择或手动输入，zui多可输入21个字符；

② 输入样品编号（Sample ID），zui多21个字符；若样品名已存在，软件将自动延续样品编号，也可手动重新输入编号；

③ 软件将自动记录日期和时间，表明样品测定的实际时间；

④ 点击MI×键，出现进样体积对话框；

⑤ 输入参数：样品量（Sample Volume）、台盼蓝用量（Dye Volume）、稀释剂用量（Diluent Volume）；

⑥ 系统将自动计算稀释比例等，可以手动输入注释（Comments）。

3. 设置测定与分析参数：

① 在分析参数栏选择需要的精度水平（Precision）：精度水平表示单次测定样品数，zui多8个；

② 选择细胞类型，默认的细胞类型有：标准大小细胞直径约12-14μm；可识别对象；小细胞直径约8μm；

③ 系统自动添加系统名和测定时间。

四、 开始测定

① 点击START MEASUREMENT键；

② 测定多个样品时，在弹出对话框后将样品板支架推进一格，点击确定自动开始测定程序； ③ 重复上一步骤测定其他样品；

④ 若测定样品多于四个，可将支架抽出后样品板调转方向重新插入进行上述测定程序； ⑤ 全部测定结束后关闭对话框。

五、 计数结果

1. 在测定界面获得结果

测定程序完成后，结果在测定界面的数据栏（Result Data）显示，数据栏有两个表格：*个表格显示总细胞数，第二个表格显示单次测定中每个样品室的测定结果。

两个表中分别列出以下参数：

Viable Cell Conc.: 活细胞浓度 [×105/mL] Total Cell Conc.: 总细胞浓度 [×105/mL] Viability (%): 细胞总数中活细胞的百分比 Total Cell Count: 测定总细胞数 Avg Compactness: 活细胞与理想状态细胞形状的平均变异程度（1表示细胞形状均一） Avg Diameter: 测定活细胞平均直径 [μm] Aggregate Rate (%):成团细胞占总细胞数的比值 Dead Cell Conc.: 死细胞浓度 [×105/mL]

Viable Cell Count: 测定活细胞数 Dead Cell Count: 测定死细胞数 Total Object Count: 全部测定数 Total Object Conc.: 总浓度 [×105/mL] Avg Object Diameter: 测定总群体平均直径 [μm] Avg Object Compactness: 所有测定群体与理想状态细胞形状的平均变异程度。

在单个样品结果表中，会有三项列在表头：

 Image No.: 图像编号l

 Valid: 表示图像质量是否能够达到分析要求l

 Excluded: 复选框以排除或包括该样品在总结果表中的显示l

2. 在柱形图中看结果：此结果不包括已经由上述复选框选择排除的计数结果 ① 在测定界面点击HISTOGRAMS键，打开柱形图对话框；

② 可选择以下项目：

成团细胞柱形图 细胞直径柱形图 细胞形状均一度柱形图 总群直径柱形图

六、 查看图像

单副图像：在测定界面的右侧显示的是选定的单个样品测定结果所对应的图像；

多幅图像：在图像显示区点击VIEW IMAGES键出现图像列表，可显示单次测定的多个样品。

1. 在图像框查看图像

图像框提供放大图像，系统自动分析活细胞与死细胞，并用绿色圈和红色圈分别标出，还可以使用下列功能：

 双击图像可打开大图，调节对比、亮度和焦距；l

 显示或隐藏细胞的圈标记；l

 浏览前后样品的图像；l

 按住左键圈定可将选定图像放大或自定义尺寸，右键点击图像进行保存或复制。l

七、 系统优化：调节白平衡

若图像亮度不均衡，则需调节白平衡，影响图像亮度的调节。

① 把载物支架拉出；

② 点击Cedex XS 控制中心中的HWM键，打开硬件管理对话框；

③ 点击WHITE BALANCE键进行调节，结果将自动保存；

④ 调节完毕后关闭对话框

八、 结果列表

1. 点击Cedex XS 控制中心中的LIST键，或在Measurements菜单中选择Measurement List，可选择以下功能：

查找结果 浏览总体的测定数据 删除结果 打印报告 结果输出保存为文件 开始新测定 查看测定过程 重新测定

2. 查找结果可以通过以下方式：选定后点击FIND键

样品处理时间 测定时间 样品名 样品编号 系统名 存档数据/全部数据 数据组 细胞类型

九、 关机

顺序为：Cedex XS 控制中心（软件）→配套电脑→计数仪